Peneliti Walanda nggabungake CRISPR lan bioluminescence ing tes eksperimen kanggopenyakit infèksius

Protein nokturnal sing mentas dikembangake bisa nyepetake lan nyederhanakake diagnosis penyakit virus, miturut peneliti ing Walanda.
Panaliten kasebut, diterbitake Rebo ing ACS Publications, nggambarake metode siji-langkah sing sensitif kanggo nganalisa asam nukleat virus kanthi cepet lan penampilane nggunakake protein biru utawa ijo sing cerah.
Identifikasi patogen kanthi ndeteksi sidik jari asam nukleat minangka strategi kunci ing diagnostik klinis, riset biomedis, lan pemantauan keamanan pangan lan lingkungan.Tes reaksi berantai polimerase kuantitatif (PCR) kuantitatif sing akeh digunakake banget sensitif, nanging mbutuhake persiapan sampel utawa interpretasi asil sing canggih, saengga ora praktis kanggo sawetara setelan kesehatan utawa setelan winates sumber daya.
Klompok saka Walanda iki minangka asil kolaborasi antarane ilmuwan saka universitas lan rumah sakit kanggo ngembangake metode diagnostik asam nukleat sing cepet, portabel lan gampang digunakake sing bisa ditrapake ing macem-macem setelan.
Dheweke diilhami dening kelip-kelip kunang-kunang, kelip-kelip kunang-kunang, lan lintang-lintang cilik saka fitoplankton akuatik, kabeh didhukung dening fenomena sing diarani bioluminescence.Efek glow-in-the-dark iki disebabake reaksi kimia sing nglibatake protein luciferase.Para ilmuwan nggabungake protein luciferase menyang sensor sing ngetokake cahya kanggo nggampangake pengamatan nalika nemokake target.Nalika iki ndadekake sensor iki cocog kanggo deteksi titik-perawatan, saiki ora duwe sensitivitas dhuwur sing dibutuhake kanggo tes diagnostik klinis.Nalika metode panyuntingan gen CRISPR bisa nyedhiyakake kemampuan iki, mbutuhake akeh langkah lan peralatan khusus tambahan kanggo ndeteksi sinyal sing ringkih sing bisa ana ing conto sing rumit lan rame.
Peneliti nemokake cara kanggo nggabungake protein sing ana hubungane karo CRISPR karo sinyal bioluminescent sing bisa dideteksi nganggo kamera digital sing prasaja.Kanggo mesthekake yen ana cukup sampel RNA utawa DNA kanggo dianalisis, para peneliti nindakake amplifikasi polimerase rekombinasi (RPA), teknik prasaja sing beroperasi ing suhu konstan sekitar 100 ° F.Dheweke ngembangake platform anyar sing diarani Luminescent Nucleic Acid Sensor (LUNAS), ing ngendi loro protein CRISPR/Cas9 spesifik kanggo bagean genom virus sing beda-beda, saben duwe fragmen luciferase unik sing dipasang ing ndhuwur.
Nalika genom virus spesifik sing diteliti dening para peneliti, loro protein CRISPR / Cas9 ikatan karo urutan asam nukleat target;padha dadi ing jarak cedhak, ngidini protein luciferase utuh kanggo mbentuk lan emit cahya biru ing ngarsane substrat kimia..Kanggo nyathet substrat sing dikonsumsi ing proses iki, peneliti nggunakake reaksi kontrol sing ngetokake cahya ijo.Tabung sing ngganti warna saka ijo dadi biru nuduhake asil positif.
Para peneliti nguji platform kasebut kanthi ngembangake tes RPA-LUNAS, sing ndeteksiRNA SARS-CoV-2tanpa isolasi RNA tedious, lan nuduhake kinerja diagnostik ing sampel swab nasopharyngeal sakaCOVID 19pasien.RPA-LUNAS kasil ndeteksi SARS-CoV-2 sajrone 20 menit ing conto kanthi viral load RNA nganti 200 salinan/μL.
Peneliti percaya yen tes kasebut bisa gampang lan efektif ndeteksi akeh virus liyane."RPA-LUNAS menarik kanggo tes penyakit infèksius point-of-care," tulise.